技术文章您的位置:网站上海11选5 >技术文章 > 明胶酶谱法分析试剂盒配置溶液时需要注意哪些问题!
明胶酶谱法分析试剂盒配置溶液时需要注意哪些问题!
发布时间:2019-06-12   点击次数:144次

明胶酶谱法分析试剂盒配置溶液时需要注意哪些问题!

 

基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase, MMP)以无活性的酶原形式分泌,活化后能够降解细胞外基质的胶原蛋白,又称胶原酶。通过影响细胞外基质,胶原酶参与胚胎发育、形态发生、组织重塑等过程,并参与炎症、肿瘤、心血管、神经等许多疾病过程。血浆与组织中的MMP-2、MMP-9参与各种生理与病理过程,其在临床诊断和治疗中的意义日益受到重视。

 

酶谱法的基本过程是先将样品进行SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE,含0.1%明胶)电泳分离,然后在有二价金属离子存在的缓冲系统中使样品中的MMP-2和MMP-9恢复活性,在各自的迁移位置水解凝胶里的明胶,最后用考马斯亮蓝将凝胶染色,再脱色,在蓝色背景下可出现白色条带,条带的强弱与MMP-2和MMP-9活性成正比。

 

明胶酶谱法分析试剂盒配置溶液时需要注意哪些问题!

 

溶液配制方法:


1. 染色液配方:0.25g 考马斯亮蓝R250+420ml 甲醇+100ml 冰乙酸,定容至1000ml,混合1h 后用
Whatman 1 号滤纸过滤,于室温可无限期保存;

2. 脱色液配方:冰醋酸:甲醇:水=7:5:88(V:V:V);

3. 保存液:7%冰醋酸;

4. 凝胶染色之后,染色液可以回收利用,装入新容器内,室温或4 ºC 保存,可反复使用2-4 次。

 

相关文献支持:

1. Nagase H and Woessner JF. Matrix Metalloproteinases. J Biol Chem, 1999, 274, 21491-21494

2. Heussen C, and Dowdle EB. Electrophoretic analysis of plasminogen activators in polyacrylamidegels containing sodium dodecyl sulfate and copolymerized substrates. Anal. Biochem,1980,102,196–202

3。绿茶多酚EGCG增强动脉粥样硬化斑块稳定性及其相关机制研究

 

明胶酶谱法分析试剂盒配置溶液时需要注意哪些问题!

网站上海11选5 关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
备案号:   GoogleSitemap   技术支持:
© 2018 南京信帆生物技术上海11选5(jienarts.com) 版权所有 总访问量:114981
    QQ在线客服
  •   在线咨询
电话
025-66060117
手机
17551010836
湖南幸运赛车 湖北11选5 广东快乐十分 浙江11选5 江苏11选5 上海时时乐 江西快3 吉林快3 江苏快3 江苏11选5