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实时荧光定量PCR检测

产品时间:2019-07-08

简要描述:

通过用SYBR荧光染料法 或者TaqMan荧光探针法,我们能为客户提供实时荧光定量PCR全套技术服务。同时我们将提供给客户完整的实验资料和分析步骤,客户只需提供标本和标本的基本信息。

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信帆生物提供 RT-PCR检测,实时荧光定量PCR实验检测测,RT-PCR代测。客户只需要提供样本,其他所有试剂都由本公司提供。一般7-10天出结果,提供原始数据,分析数据,实验报告,实验室所用仪器型号,图片,动力扩增曲线等。

 

Real -Time PCR,即实时监测PCR扩增产物并进行解析的方法,它是在PCR反应体系中加入荧光物质,并通过Real -Time PCR检测系统对PCR反应进程中的荧光信号强度进行实时监测,最终对实验数据进行分析处理的方法。Real -Time PCR自1996年由美国Applied Biosystems公司推出以来,广泛应用于生物研究的各个领域。目前主要有SYBR Green 染料、Taqman探针法两种。
 
服务内容
    通过用SYBR荧光染料法 或者TaqMan荧光探针法,我们能为客户提供实时荧光定量PCR全套技术服务。同时我们将提供给客户完整的实验资料和分析步骤,客户只需提供标本和标本的基本信息。

 

技术优势


1。 使用进口稳定的定量PCR仪

2。 核心试剂采用原装试剂,实验结果准确,重复性好。
3. 丰富的qPCR经验,基因类别有DNA、mRNA、miRNA等;物种类别有人、鼠、鸡、牧草、酵母菌、金黄色葡萄菌等。

 

客户须知:

  1. 客户须在实验开始前确保其提供材料的数量和质量,并提供相关信息,客户应当清楚要检测的成份是否足够稳定;
  2. 尽可能新鲜和足量的组织(50-100mg)、细胞样品(106)或血清,或直接提供纯化好的总RNA≥0.5μg/样品);
  3. 所需要检测mRNA注册号和名称;

服务承诺:

  1. 我方对实验结果以及客户所提供的资料保密,未经客户许可,我方不得将客户的实验内容、实验结果和相关信息对外公布。
  2. 本公司将在收到客户样本后并签订合同的第二个工作日起开始检测工作。
  3. 提供给客户原始实验数据以及详细的实验流程及报告。

 

RT-PCR实验流程

1.实验用品准备;

2。样本总RNA提取;

3。RNA浓度检测;

4.反转录;

5.数据分析及结论。

 

 
PCR实验中注意事项:
1)所用的所有溶液都应该没有核酸和(或)核酸酶(DNase和RNase)污染。
2)所有PCR试剂中使用的水都应该是高质量的-新鲜蒸馏的去离子水,用0.22μm过滤的,并且是高压灭菌。
3)在20
到25贮存的试剂建议加点像叠氮钠一类的抗微生物剂,在扩增试剂或样品制备试剂中加入0.025%的叠氮钠不抑制扩增反应。
4)所用试剂都应该以大体积配制,实验一下看试剂是否满意,然后分装成仅够一次使用的量进行贮存。
5)所有试剂和样品准备过程中都要使用一次性灭菌的瓶子和管子。
6)新配制的试剂在用于准备新的标本之前应该加以检验。
7)样品准备和前PCR区所使用的移液管在不使用时都应该小心保存。


 


 

荧光定量 PCR 中的一些术语
CT值:荧光信号有统计意义显著增长(即穿过阈值线)时的循环次数,或者说是从基线到指数增长的拐点所对应的循环次数。
阈值:阈值的默认设置是 3-15 个循环的荧光信号的标准偏差的 10 倍。
CT值与起始模板的量成线性关系。

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